一般化学工业论文_脂肪酶HL1232脱除大豆毛油中(3)

^-10 s)分别降至1.35和0.86(×10^-10 s),证实HL1232分别与这些底物结合时,C-末端α-螺旋片段构象发生了明显位移。同时,磷脂底物和HL1232结合时,311位赖氨酸所处环境极为显著地从亲水环境变为疏水环境。而甘油三酯和HL1232结合时,311位赖氨酸所亲疏水环境变化幅度不大。因此,从构象角度推测,311位赖氨酸所在的C-末端α-螺旋片段偏好于与磷脂底物的结合,为锚定磷脂底物构象发生翻转;但排斥与甘油三酯结合,呈现挤开甘油三酯的趋势。实验还证实了C-末端α-螺旋片段与作为对照的甘油二酯几乎无相互作用。（2）从分子水平通过分子模拟技术来阐明C-末端α-螺旋片段作用于HL1232底物选择性的机理:采用分子对接以及分子动力学模拟的方法研究HL1232与不同底物结合情况,发现在不结合底物或者仅与甘油二酯底物结合时,HL1232 C-末端α-螺旋片段构象几乎没有变化;与甘油三酯底物结合时,C-末端的α-螺旋片段呈现出整体移动而挤兑甘油三酯的趋势;与PC磷脂底物结合时,C-末端的α-螺旋结构发生了极为明显的构象翻转并锚定磷脂底物。同时,模拟结果也证实了TLL对于甘油三酯有较强的结合力,而对磷脂底物缺乏稳定的结合作用力。综上所述,通过波谱学和分子模拟技术阐明了相对于TLL和PCEST等脂肪酶,HL1232偏好于水解磷脂底物而排斥水解甘油三酯底物的选择偏好性分子机制。同时,也解释了HL1232拥有的优秀脱胶效率的机理。

文章关键词:

论文DOI:10.27151/d.cnki.ghnlu.2019.004138

论文分类号:TS224

文章来源：《波谱学杂志》 网址: http://www.bpxzz.cn/qikandaodu/2021/1110/372.html